Analyseur biochimique : introduction à trois méthodes d'analyse couramment utilisées

Avec les progrès continus de la technologie médicale, les analyseurs biochimiques, en tant qu’outils clés du diagnostic médical, jouent un rôle important dans les applications cliniques. Les analyseurs biochimiques peuvent analyser rapidement et avec précision les composants chimiques de divers échantillons biologiques, fournissant ainsi aux médecins une base de diagnostic importante et des suggestions de traitement. Dans cet article, nous présenterons les trois principales méthodes d'analyse couramment utilisées dans les analyseurs biochimiques pour aider chacun à mieux comprendre le principe de fonctionnement et les scénarios d'application de cet équipement médical.

Il existe trois catégories de méthodes d'analyse couramment utilisées pour les analyseurs biochimiques, à savoir la méthode du point final, la méthode à temps fixe et la méthode cinétique.
Méthode du point final :

Cela signifie qu'après une période de réaction, la réaction atteint l'équilibre. Puisque la constante d'équilibre de la réaction est très grande, on peut considérer que tous les substrats (substances d'essai) sont convertis en produits. L'absorbance de la solution réactionnelle ne change plus et n'est lié qu'à la concentration de l'analyte. Ce type de méthode est souvent appelé méthode « point final », ou plus précisément méthode « équilibrée ».
Méthode de point final à longueur d'onde unique à réactif unique : ajoutez le réactif (volume V) à t1, ajoutez l'échantillon (volume S) à t2, puis remuez et réagissez, puis commencez à mesurer l'absorbance de la solution réactionnelle, et la réaction atteint la fin point à t3, t3-t2 pour mesurer le temps.
Réactivité : R=At3-At2-1×V/(V+S), ou R=At3-ARBLK.
Parmi eux : Ati est l’absorbance au temps i et ARBLK est l’absorbance du blanc réactif.
Méthode de point final à double longueur d'onde avec un seul réactif : fondamentalement identique à la "méthode de point final à une seule longueur d'onde avec un seul réactif", sauf que pour chaque cycle de mesure, l'absorbance réelle est égale à Aλ1-Aλ2.
Méthode à double réactif et à point final à longueur d'onde unique : ajouter le premier réactif (volume V1) à t1, ajouter l'échantillon (volume S) à t2 et remuer immédiatement, ajouter le deuxième réactif (volume V2) à t3 et remuer immédiatement, et réagir à t4 Atteignez la fin. t3-t2 est le temps d'incubation, t4-t3 est le temps de mesure.
Dans les paramètres du projet, si l'heure de début de la réaction est réglée sur 0, alors le degré de réaction R = absorbance au temps A - absorbance du blanc de réactif double. Si le temps de début de la réaction est inférieur à 0, alors le degré de réaction R=At4 - l'absorbance du blanc de réactif double - l'absorbance du point de consigne entre t3 et t2 × (V1 + S) / (V1 + S + V2). Méthode de point final à double longueur d'onde à double réactif : fondamentalement identique à la « méthode à point final à double longueur d'onde à double réactif », sauf que pour chaque cycle de mesure, l'absorbance réelle est égale à Aλ1-Aλ2.

Méthode à temps fixe :
Également connue sous le nom de méthode cinétique du premier ordre, méthode cinétique en deux points, etc., cela signifie que dans un certain temps de réaction, la vitesse de réaction est proportionnelle à la puissance première de la concentration du substrat, c'est-à-dire v = k[ S]. À mesure que le substrat est continuellement consommé, la vitesse de réaction totale est continuellement réduite, ce qui se manifeste par une modification de plus en plus faible de l'absorbance. Ce type de réaction met beaucoup de temps à atteindre l'équilibre et peut théoriquement être surveillé à tout moment. Cependant, en raison de la composition complexe du sérum, la réaction est plus compliquée et de nombreuses réactions diverses se produisent au début de la réaction. est nécessaire avant de pouvoir entrer dans la période de réaction stable.
Ajouter le réactif (volume V) à t1, puis mesurer l'absorbance du blanc réactif, ajouter l'échantillon (volume S) à t2, la réaction est stable à t3, arrêter le suivi de la réaction à t4 ; t2-t3 est le temps de retard , t3-t4 pour mesurer le temps.
Réactivité à une seule longueur d'onde (les réactifs simples et doubles sont identiques) : R=At4—At3
Réactivité double longueur d'onde : R = (Absorbance de la longueur d'onde principale au temps t4 - Absorbance de la sous-longueur d'onde au temps t4) - (Absorbance de la longueur d'onde principale au temps t3 - Absorbance de la sous-longueur d'onde au temps t3)

Méthode dynamique :
Également connue sous le nom de méthode cinétique d'ordre zéro, cela signifie que la vitesse de réaction est proportionnelle à la puissance zéro de la concentration du substrat, c'est-à-dire qu'elle n'a rien à voir avec la concentration du substrat. Par conséquent, pendant tout le processus de réaction, les réactifs peuvent générer un certain produit à une vitesse uniforme, provoquant une diminution ou une augmentation uniforme de l'absorbance de la solution mesurée à une certaine longueur d'onde. Le taux de diminution ou d'augmentation (ΔA/min) est constant. avec la substance mesurée, proportionnellement à l'activité ou à la concentration. La méthode cinétique est également appelée méthode de surveillance continue ; elle est principalement utilisée pour la détermination de l’activité enzymatique.
En fait, comme la concentration du substrat ne peut pas être suffisamment élevée, à mesure que la réaction se déroule et que le substrat est consommé dans une certaine mesure, la vitesse de réaction n'est plus d'ordre zéro. Par conséquent, la méthode cinétique d'ordre zéro vise une période de temps spécifique. ;De même, en raison de la composition complexe du sérum, la réaction est plus compliquée et il y a de nombreuses réactions diverses lorsque la réaction vient juste de démarrer. Un délai est nécessaire avant de pouvoir entrer dans la période de réaction stable. Chaque fabricant de réactifs a des réglementations strictes sur ces deux périodes.
Ajoutez le réactif (volume V) à t1, ajoutez l'échantillon (volume S) à t2, la réaction est stable à t3, et arrêtez de surveiller la réaction à tn ; t3-t2 est le temps de retard et tn-t3 est la mesure. temps. Réactivité à une seule longueur d'onde (les réactifs simples et doubles sont identiques) R = (n∑AT-∑A∑T)/[n∑T2-(∑T)2], où : n=le nombre de données entre t3 et tn, T= Temps, A=absorbance à un certain moment. La réactivité à double longueur d'onde est fondamentalement la même que celle à longueur d'onde unique, sauf que l'absorbance à un certain moment est égale à l'absorbance de la longueur d'onde principale moins l'absorbance de la sous-longueur d'onde.

Scénarios d'application
La large application des analyseurs biochimiques a pénétré de nombreux domaines médicaux tels que les hôpitaux, les cliniques et les laboratoires. Il peut non seulement être utilisé pour le diagnostic clinique afin d'aider les médecins à déterminer avec précision le type et la gravité de la maladie, mais peut également être utilisé pour le suivi de la pharmacothérapie, l'évaluation des effets du traitement et l'ajustement des plans de traitement. En outre, les analyseurs biochimiques jouent également un rôle important dans la recherche scientifique et le développement de nouveaux médicaments, apportant ainsi une contribution importante au progrès de la science médicale.

Conclusion
En tant qu'outil important pour le diagnostic médical et la recherche scientifique, les analyseurs biochimiques continuent de promouvoir le développement et le progrès de la technologie médicale. Grâce à une variété de méthodes d'analyse telles que la photométrie, l'électrochimie et la chimie instrumentale, les analyseurs biochimiques peuvent réaliser une analyse rapide et précise de divers composants dans des échantillons biologiques, fournissant ainsi un support technique fiable pour le diagnostic clinique, le traitement et la recherche scientifique. On pense qu’avec l’innovation et le développement continus de la technologie, les analyseurs biochimiques joueront un rôle plus important à l’avenir et apporteront une plus grande contribution à la santé humaine.