Précautions d'utilisation du système d'analyse par imagerie sur gel

Avec la vulgarisation progressive de la recherche en biologie moléculaire, la demande de systèmes d’imagerie sur gel en Chine augmente. Quel que soit le but, les composants du système d’imagerie sur gel sont similaires : un système de prise de vue, une boîte noire avec une source de lumière spéciale et un logiciel d’acquisition et d’analyse des images de gel.

1. Qu'est-ce qu'un système d'analyse par imagerie sur gel ?

L'imagerie sur gel est la détection et l'analyse par imagerie non chimiluminescente de différentes colorations d'électrophorèse sur gel telles que l'ADN/ARN/protéine (comme EB, Coomassie Brilliant Blue, Silver Staining, SYBR Green) et les microplaques, plats plats, etc. Système d'imagerie sur gel peut être utilisé pour la recherche de routine en bio-ingénierie telle que le calcul du poids moléculaire, l'analyse de densité, la quantification de la densité, la quantification PCR, etc.

2. Classification du système d'analyse par imagerie sur gel
Système général d'analyse par imagerie sur gel
Peut collecter des images d'échantillons de gel d'électrophorèse de protéines et de gel d'ADN et effectuer des analyses qualitatives et quantitatives. Les échantillons comprennent : la surveillance des acides nucléiques colorés avec EB, SYBRGreen, SYBRGold, TexasRed, GelStar, Fluoroscecin, RadiantRed, etc. ; et gels protéiques colorés avec CoomassieBlue, SYPROOrange, divers colorants, tels que le colorant Cow, etc. (ou UV, EB et imagerie d'échantillons colorés et visibles).

Système d'analyse par imagerie par chimiluminescence
Le système d’imagerie sur gel couvre l’imagerie des échantillons UV, EB, chimiluminescence, fluorescence ultraviolette, colorée et visible.

Système d'analyse d'imagerie par fluorescence multicolore
La gamme d’imagerie couvre l’imagerie UV, EB, la chimiluminescence, la fluorescence multicolore, l’imagerie d’échantillons colorés et visibles.

Système d'imagerie multifonctionnel in vivo UV, EB, chimiluminescence, fluorescence multicolore, imagerie d'échantillons colorés et visibles et tissus in vitro, petits animaux et grands animaux.

3. Principe du système d'analyse par imagerie sur gel
Le taux de migration des échantillons sur gel d'électrophorèse ou sur d'autres supports est différent. La comparaison avec des produits standards ou d'autres produits standards alternatifs peut permettre une analyse qualitative d'échantillons inconnus. C'est la base de l'analyse qualitative du système d'analyse d'images. Selon la position des échantillons inconnus dans le spectre, une analyse qualitative peut être effectuée sur ceux-ci pour déterminer leur composition et leurs propriétés.

L'échantillon absorbe partiellement la lumière projetée ou réfléchie, de sorte que la densité optique de la bande d'échantillon sur l'image obtenue par photographie sera différente. La densité optique est linéairement liée à la concentration ou à la masse de l'échantillon. Selon la densité optique de l'échantillon inconnu, la concentration ou la masse de l'échantillon inconnu peut être obtenue en la comparant à l'indice de densité optique de la bande d'échantillon de concentration connue. C'est la base de l'analyse quantitative du système d'analyse d'images. La dernière source de lumière à transmission ultraviolette et la source de lumière à transmission de lumière blanche rendent la distribution de la lumière plus uniforme et minimisent l'influence d'une densité optique inégale sur les résultats.

4. Champ d'application du système d'imagerie sur gel
En général, l'imagerie sur gel peut être appliquée à : Le système d'imagerie sur gel peut être utilisé pour l'analyse qualitative des résultats de séparation et de purification des protéines, des acides nucléiques, des peptides, des acides aminés, des polyaminoacides et d'autres molécules biologiques.
Quantification du poids moléculaire
Pour les films d'ADN couramment utilisés, la fonction de quantification du poids moléculaire est utilisée pour générer automatiquement une courbe d'ajustement en annotant le poids moléculaire connu de la bande de marqueur d'ADN sur le gel, et l'utiliser pour mesurer le poids moléculaire de la bande inconnue. Les résultats obtenus par cette méthode sont bien plus précis que l’observation à l’œil nu.

Quantification de la densité
La méthode couramment utilisée pour déterminer la concentration d'ADN (acide désoxyribonucléique) et d'ARN (acide ribonucléique) est la méthode d'absorption ultraviolette, mais elle ne peut déterminer que la concentration totale de nucléotides dans l'échantillon, mais ne peut pas distinguer la concentration de chaque fragment de longueur. À l'aide du système et du logiciel d'imagerie sur gel, après avoir calibré la densité d'une bande standard avec une teneur en ADN connue sur le film d'ADN, vous pouvez facilement cliquer sur d'autres bandes inconnues et les comparer avec la densité des bandes connues pour obtenir la teneur en ADN inconnue. . Cette méthode convient également à la détermination de la concentration des bandes de gel de protéine PAGE.

Numérisation de densité
Dans la recherche en biologie moléculaire et en bio-ingénierie, la méthode la plus couramment utilisée consiste à calculer le pourcentage de produits d’expression protéique dans l’ensemble de la protéine bactérienne. La méthode traditionnelle consiste à utiliser un balayage de densité dédié, mais ce travail peut être complété en utilisant un logiciel d'analyse biologique combiné à un scanner habituellement équipé en laboratoire ou en utilisant directement la lumière blanche pour irradier l'imagerie sur gel.

Quantification PCR
La quantification PCR signifie principalement que si la bande amplifiée par l'expérience PCR n'en est pas une, alors le logiciel peut être utilisé pour calculer le pourcentage relatif de chaque bande dans la bande totale. En termes de fonction, elle est similaire au balayage de densité, mais le principe réel est différent. La quantification PCR consiste à effectuer une quantification de densité relative sur les bandes sélectionnées et à calculer leur pourcentage du total. Lors du balayage de densité, un graphique de courbe de balayage longitudinal est généré pour la zone sélectionnée et intégré.

5. Maintenance du système d'imagerie sur gel
Le cycle de maintenance de l’imageur sur gel est généralement d’environ deux semaines. L'instrument doit être maintenu propre et la périphérie de la surface est propre ; Allumez l'instrument et le logiciel, observez si le câble de données du logiciel est en contact normal et si la fonction de fonctionnement du logiciel est intacte.

L'album informatique de l'instrument doit être dédié pour éviter toute infection par un virus informatique, ce qui le rendrait inutilisable. Dans le même temps, il est interdit de réinstaller le système, car le logiciel de l'instrument doit être réactivé après la réinstallation avant de pouvoir être utilisé.

La méthode de fermeture correcte doit être utilisée pour l’opération de fermeture de la boîte noire. Le processus spécifique consiste à couvrir la porte de la boîte noire jusqu'à une position d'environ 60 degrés, à la lâcher et à compter sur la gravité pour fermer la porte d'elle-même. A noter qu’il est interdit de pousser fort la porte du dark box pour la fermer.

Pendant le processus normal d'utilisation et de maintenance, veillez à garder la boîte à lumière UV et le panneau de lumière blanche de projection propres pour éviter d'affecter l'effet d'imagerie sur gel de l'imageur sur gel.

Lors du fonctionnement de l'imageur sur gel, en plus d'utiliser correctement l'instrument, il est également nécessaire de respecter strictement les réglementations du laboratoire. Le système d'imagerie sur gel peut effectuer une analyse qualitative des résultats de séparation et de purification d'autres molécules biologiques telles que des protéines, des acides nucléiques, des peptides, des acides aminés et des acides polyaminés.

6. Précautions d'utilisation du système d'imagerie sur gel
Allumez d’abord le système d’imagerie sur gel, puis allumez l’ordinateur et entrez dans le logiciel.
Lorsque vous prenez des photos sur gel ultraviolet, évitez que l'EB ne contamine l'instrument et ne touchez pas la porte du système d'imagerie sur gel avec des gants contaminés.
Pendant le processus de prise de photos avec des sources de lumière ultraviolette, le panneau avant du système d'imagerie sur gel ne peut pas être ouvert.
Après avoir pris des photos, retirez les déchets de colle et essuyez-les avec du papier plus doux.
Soyez doux lors de la mise au point et ne bougez pas violemment.
Veuillez utiliser une alimentation stabilisée.
Gardez l'environnement intérieur sec et essuyez à temps l'eau ou d'autres liquides laissés sur le tableau d'observation.
Lors de l'utilisation de l'instrument, fermez hermétiquement la porte et la plate-forme d'observation, sinon la lampe ultraviolette ne pourra pas être utilisée normalement.
Essayez de ne pas connecter l'ordinateur à Internet ou au réseau local et installez un logiciel antivirus sur l'ordinateur pour vous assurer que l'ordinateur est dédié à une utilisation spécifique.
Lorsque l'instrument n'est pas utilisé pendant une longue période, veuillez couvrir l'instrument avec un cache-poussière.
Pour prolonger la durée de vie de la lampe, veuillez éteindre la source de lumière à temps après avoir observé le gel.

Le système d'analyse par imagerie sur gel est un outil indispensable dans la recherche en biologie moléculaire et le diagnostic clinique. Il fournit aux scientifiques et aux médecins de puissants outils de diagnostic et de recherche grâce à une imagerie de haute précision et à une analyse logicielle avancée, qui aident à comprendre et à traiter diverses maladies. Avec le développement continu de la technologie, les performances et la gamme d'applications du système d'analyse par imagerie sur gel continueront de s'étendre, contribuant ainsi davantage au développement des sciences de la vie.